微生物實驗玻璃器皿的清潔與滅菌

食品微生物檢測實驗室使用的玻璃器皿種類很多，應按不同的使用要求選擇不同的玻璃品種，大多數選用中興(xing) 硬質玻璃（硼酸鹽玻璃），硬質玻璃能耐高熱、高壓、抗溫度急變性好、耐腐蝕性好，同時其中遊離堿含量低，不會(hui) 影響培養(yang) 基的酸堿度。現將玻璃器皿的清潔與(yu) 滅菌介紹如下。

一、玻璃器皿的清潔

1.新購進玻璃器皿的處理

新購進玻璃器皿上一般附有遊離堿性物質，不能直接使用，應在2%鹽酸溶液中浸泡幾小時，把表麵的堿性中和後，再用肥皂水或洗衣粉洗刷玻璃器皿的內(nei) 外，然後用清水反複衝(chong) 洗，來出去殘留的酸質，最後用蒸餾水衝(chong) 洗幹淨。

2.對反複使用的玻璃器皿的處理

常用的玻璃器皿，如平皿、試管、燒杯、燒瓶等，要先高壓滅菌（121℃、30min），趁熱倒掉容器中的廢棄物，以溫水衝(chong) 淨，再加5%肥皂水煮沸5min，然後趁熱洗刷幹淨，最後用蒸餾水衝(chong) 洗幹淨。

3.載玻片與(yu) 蓋玻片

新買(mai) 的載玻片與(yu) 蓋玻片，以新購進的玻璃器皿處理方法清洗;用過載玻片的可以放入2%來蘇爾或5%石碳酸溶液中浸泡好後，取出後水洗，再用5%肥皂水煮沸20min，然後用毛刷蘸肥皂刷洗，最後用清水反複衝(chong) 洗幹淨。載玻片浸泡在95%的酒精1min，取出用軟布擦幹，再放入盛蒸餾水的燒杯中浸泡5min以除去溶劑，烘幹備用。

4.清潔劑的種類及使用

玻璃儀(yi) 器常用的清潔劑是洗衣粉、去汙粉、肥皂、洗液、有機溶劑等。對於(yu) 可以用刷子直接刷洗的玻璃器皿，可用肥皂、洗衣粉、去汙粉的水溶液直接刷洗。對於(yu) 蒸餾瓶、容量瓶、移液管、滴定管等不容易用刷子刷的儀(yi) 器，用洗液洗。洗液還可以用來洗刷子刷不下的頑固汙漬和久置不用的器皿，洗刷頑固汙漬時，要有足夠的浸泡時間。使洗液與(yu) 儀(yi) 器表麵的汙物充分發生化學作用；有機溶劑可以用來去除器皿表麵的油脂，如甲苯、二甲苯、汽油等；有的也可利用能與(yu) 水混合又易揮發的特點去除儀(yi) 器上的水，如酒精等。

5.玻璃儀(yi) 器的洗滌方法與(yu) 要求

（1）人工清洗：帶幹淨的手套或洗淨手，用清水衝(chong) 洗器皿；選擇合適的潔淨劑洗刷或浸泡；先用自來水衝(chong) 洗，再用蒸餾水順壁衝(chong) 洗充分震蕩，直至玻璃器皿上掛不住水珠，用指示劑檢查為(wei) 中性。

（2）超聲波清洗：加入清洗劑，利用清洗劑的化學作用和超聲波的物理作用，達到對玻璃器皿的成分清洗的目的，超聲波在30℃~40℃時淨化效果較好，在實際工作中一般采用40℃~60℃的工作溫度。用清洗劑洗刷完後，再用清水洗，直至達到玻璃器皿清洗要求。

6.玻璃器皿洗刷應注意的問題

含油脂（石蠟油、凡士林）的玻璃器皿要單獨清洗，洗刷前盡量先去油，單獨高壓滅菌後，趁熱倒掉汙物，然後將玻璃器皿倒置於(yu) 鋪有粗吸水紙的鐵絲(si) 筐內(nei) ，放於(yu) 100℃烘箱內(nei) 0.5h，取出後再放入5%碳酸氫鈉水中煮兩(liang) 次，然後用肥皂水刷洗幹淨，最後用蒸餾水衝(chong) 洗幹淨。

用來做熒光分析的玻璃器皿儀(yi) 器應避免用洗衣粉洗，因洗衣粉中的熒光增白劑會(hui) 影響實驗結果。

二、玻璃器皿的包紮

玻璃器皿在滅菌前，應用紙或金屬桶等包裹，防止消毒滅菌後，被外界的雜菌所汙染。

1.燒杯、三角瓶、試管等

可用做好的合適的棉塞塞好，外麵再用紙和細繩包紮一下，以防棉塞掉下。燒杯可用紙和繩包紮即可。燒杯、三角瓶和試管包紮見下圖。

2.培養(yang) 皿

可用牛皮紙或雙層報紙單個(ge) 或數個(ge) 包成一包，也可直接放入特製的培養(yang) 皿滅菌金屬桶內(nei) ，加蓋滅菌。用牛皮紙或報紙包紮的過程如下圖。

（1）將12個(ge) 玻璃培養(yang) 皿按圖2~4個(ge) 堆放在牛皮紙或雙層報紙（4開，39cm×54cm）上，兩(liang) 頭擰緊。

（2）用雙手拇指和食指將紙邊裹在平皿堆表麵，同時用雙手的無名指和小指擠緊平板。將平皿堆向前滾，順勢將紙緊緊包裹在平皿堆的外麵，整個(ge) 推進的過程中雙手無名指和小指都要擠緊平板。包裹的鬆緊程度直接決(jue) 定最終的包紮質量。

（3）當紙全部包裹在平板堆表麵後，將平板堆數值放在桌麵上。將平板堆兩(liang) 頭的紙依次疊好別緊。

3.移液管

在包裝前先用長針等在上口處塞少量的棉花（勿用脫脂棉），既可防止吸取液體(ti) 時，液體(ti) 被吸出造成汙染，又可對吹入吸管的空氣起一個(ge) 過濾作用。塞入的棉花的量要適宜，距管口約0.5cm左右，棉花的長度約1cm~1.5cm。棉花要塞得鬆緊適度，吹時既能通氣又不能使棉花下滑。移液管可用紙分別卷包，也可用多支包成一束或裝入金屬桶進行滅菌。

單支移液管的包裝可先將牛皮紙（或報紙）剪成約5cm的長紙條，再將移液管的尖duan放在紙的一段，約成45°角，折疊包好尖duan，一手拿管身，一手壓緊管和紙，在桌上向前搓滾，使紙成螺旋狀把管包起來，上端剩餘(yu) 的紙條折疊後打結即可。見下圖。

三、玻璃器皿的滅菌

1.幹熱滅菌

玻璃器皿幹燥包裝後可在電熱幹燥箱內(nei) 進行幹熱滅菌，加熱160℃~180℃，維持2h。包裝放置在幹燥箱內(nei) ，不要和箱壁接觸，打開電源後，先把箱頂部的通氣孔打開一點，讓濕空氣逸出，當箱內(nei) 溫度達到100℃後，關(guan) 閉通氣孔。調節溫度控製旋鈕到設定的溫度，升溫至所設定的溫度時，維持1h~2h進行滅菌。滅菌完成後，關(guan) 掉電源，冷卻到60℃時，再打開箱門。溫度控製旋鈕歸位，並打開頂部通氣孔。滅菌後的器皿，要1周內(nei) 用完。

2.高壓蒸汽滅菌

在高壓蒸汽滅菌器內(nei) 進行，是一種普遍的、有效的滅菌方法。

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